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理论教学
人类CC3配体样蛋白1在果蝇Schneider-2细胞的表达和活性分析
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人类CC3配体样蛋白1在果蝇Schneider-2细胞的表达和活性分析
作者:佚名 文章来源:
医学教育网
点击数 更新时间:2010/3/6 16:51:00 文章录入:admin 责任编辑:admin
中国研究者对HIV-1辅助受体趋化因子受体5(CCR5)配体人类CC3配体样蛋白1(CCL3L1)进行果蝇Schneider-2细胞融合蛋白表达,纯化后活性分析。他们采用克隆人类CCL3L1cDNA,构建CCL3L1表达载体pMT/BiP/His,获得Schneider-2果蝇细胞表达的His-CCL3L1融合蛋白,同时克隆pCDNA3.1-flag—CCR5表达载体,培养稳定表达flag—CCR5的细胞株,检测表达人趋化因子CCL3L1活性。研究结果发现,成功构建人趋化因子CCL3L1融合蛋白真核表达载体pMT/BiP/His,表达并纯化出融合蛋白His—CCL3L1.免疫沉淀法和Western印迹法分析发现,纯化的His—CCL3L1蛋白能特异性结合CCR5受体,His—CCL3L1蛋白在浓度1~50nmol/L存在剂量依赖性,50~100nmol/L无剂量依赖性。由此,研究者得出结论,果蝇Schneider-2细胞表达的His—CCL3L1蛋白具有与天然CCL3L1相同的生物学活性,为进一步探讨CCL3L1影响HIV-1感染的机制奠定了基础。
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