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贲门痉挛-放射诊断学 本病病因尚未完全明了,但因发现其食管下段肠肌丛(奥氏神经丛)的神经节细胞变性和数量减少,多认 |
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负载慢性髓系白血病28的树突状细胞介导的抗淋巴细胞白血病效应 |
作者:佚名 文章来源:医学教育网 点击数: 更新时间:2010/3/6 |
该项研究目的是构建慢性髓系白血病(CML)28的树突状细胞(DC)核酸疫苗,观察其对淋巴细胞白血病的抗肿瘤效应。
方法采用从pcDNA3.1HisA—CML28中克隆出6×His及CML28的cDNA全长,酶切后连接至真核表达载体pIRES2-增强型绿色荧光蛋白(EGFP);从健康人外周血中分离外周血单个核细胞(PBMC),在白介素4(IL4)和粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSF)条件下诱导分化为DC;用电穿孔法将重组质粒pIRES2-EGFP—CML28导入DC,Westernblot检测His—CML28融合蛋白的表达,荧光显微镜检测EGFP的表达;用表达CML28的DC刺激同基因型淋巴细胞作为效应细胞,淋巴细胞白血病患者的PBMC作为靶细胞,以乳酸脱氢酶(LDH)释放实验测定其抗肿瘤效应。结果重组质粒pIRES2-EGFP—CML28导入DC后,能正确表达His—CML28融合蛋白及EGFP.经表达CML28的DC刺激的同基因型淋巴细胞能特异性杀伤淋巴细胞白血病患者的PBMC,杀伤率为68.3%,明显高于空白对照组(25.8%)和阴性对照组(20.7%),差异有统计学意义(P〈0.01);而对健康人PBMC的杀伤活性较弱,杀伤率为20.5%。
由此得出结论CML28能诱导特异性的细胞免疫,负载CML28的DC疫苗在体外对淋巴细胞白血病具有显著的抗肿瘤效应。
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