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  • p27^kip1及其出核相关分子激活蛋白1辅因子在淋巴瘤细胞中的表达及相互关系

    作者:佚名    文章来源:医学教育网    点击数:    更新时间:2010/3/6

      该项研究目的探讨p27^kip1及其出核相关分子激活蛋白1(AP-1)的辅助因子Jab1在淋巴瘤细胞中的表达变化及相互关系。

      方法采用血清饥饿合并释放方法同步化处理淋巴瘤细胞系Jurkat和Raji细胞,分别采用Westernblot及RT—PCR技术检测p27^kip1、Jab1在淋巴瘤细胞中的蛋白表达水平和mRNA表达水平变化;采用来普霉素B(LMB)刺激增殖过程中的淋巴瘤细胞,检测p27^kip1、Jab1的表达变化;构建人Jab1基因的pcDNA3.1-myc-Jab1的真核表达质粒,脂质体转染Jurkat细胞,配合免疫荧光技术检测p27^kip1的亚细胞定位情况;免疫沉淀检测Jurkat和Raji细胞中p27^kip1与Jab1的结合情况。结果血清饥饿导致Jurkat和Raji细胞生长周期停滞,p27^kip1蛋白总量增加,Jab1蛋白总量减少。血清释放后两者的蛋白水平呈现相反的表达变化,而p27^kip1mRNA水平无明显改变。LMB可以抑制由血清释放引起的细胞增殖,在此过程中p27^kip1表达上调,Jab1表达下调。转染Jab1真核表达质粒的Jurkat细胞p27^kip1定位有明显的改变。免疫沉淀结果显示在Jurkat和Raji细胞中p27^kip1与Jab1相互结合。

      由此得出结论Jab1可能通过与p27^kip1结合来介导p27^kip1的核内外分布并影响其表达,进而影响p27^kip1的功能状态,从而参与调控淋巴瘤细胞的生长。

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