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贲门痉挛-放射诊断学 本病病因尚未完全明了,但因发现其食管下段肠肌丛(奥氏神经丛)的神经节细胞变性和数量减少,多认 |
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纤溶酶原激活物抑制剂-1小干扰RNA对肝星状细胞生物学特性的影响 |
作者:佚名 文章来源:医学教育网 点击数: 更新时间:2010/3/6 |
该项研究目的是研究化学合成纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)小干扰RNA(siRNA)对肝星状细胞(HSC)PAI-1基因表达及生物学特性的影响。
方法采用将化学合成抗PAI-1-siRNA以Lipofectamine包裹,转染HSC—T6细胞,设阴性对照和空白对照,抽提细胞总RNA及蛋白质,收集培养上清液,应用逆转录-聚合酶链反应和免疫细胞荧光法检测细胞PAI—1表达。应用MTT法和流式细胞仪检测细胞增殖和细胞周期变化,应用酶联免疫吸附法检测培养上清液中Ⅰ、Ⅲ型胶原含量。结果转染siRNA的HSC—T6细胞PAI-1基因表达水平明显下调,HSC—T6细胞增殖抑制明显,48h和72h时培养上清液中Ⅰ型胶原表达水平显著减少,分别比阴性对照下降(20.71±8.40)%和(37.97±6.40)%(F=42.69.P=0.0001),Ⅲ型胶原含量于72h时降低(35.98±4.60)%(F=105.52,P=0.0001)。
由此得出结论化学合成抗PAI-1-siRNA能高效抑制HSC—T6PAI-1表达,抑制HSC—T6细胞增殖,显著减少Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成和分泌,具有预防及治疗肝纤维化的潜力。
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