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  • 细胞周期的DNA检测

    作者:佚名    文章来源:医学生联盟    点击数:    更新时间:2010/5/11

      Ⅰ、样品准备:准备以下一种或几种样品。

      A、组织单细胞悬浮液(如淋巴腺、脾、骨髓、胎盘细胞)

      B、组织培养细胞

      C、Ficoll-hypaque分离的单核细胞

      Ⅱ、反应体系-DNA低渗缓冲液

      柠檬酸三钠 0.25g

      Triton-X 100 0.75ml

      Propidium iodide 0.025g

      核糖核酸酶 0.005g

      蒸馏水 250ml

      我们将该DNA低渗溶液于密闭瓶子中存放数月后并无发现有任何染色活性的丢失Ⅲ、染色

      1、每一个管子中放入1×106个细胞;

      2、样品离心后尽可能完全地移去上清液,并且不要打碎沉淀块;

      3、入1ml的DNA低渗染色缓冲液至沉淀中,并混匀;

      4、样品于4℃下避光30分钟或最长不超过1个小时以备流式细胞仪分析。

      注意:延长在低渗缓冲液的曝光时间会引起样品碎片的增加。

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