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贲门痉挛-放射诊断学 本病病因尚未完全明了,但因发现其食管下段肠肌丛(奥氏神经丛)的神经节细胞变性和数量减少,多认 |
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NG2基因小发夹结构RNA对高糖诱导的大鼠系膜细胞增殖有明显抑制作用 |
作者:佚名 文章来源:医学教育网 点击数: 更新时间:2010-3-6 |
中国研究者构建针对NG2基因的小发夹结构RNA(shRNA)真核表达载体,观察该shRNA诱导的RNA干扰(RNAi)对高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞(RMC)增殖的影响。研究者用体外培养RMC,高糖(30mmol/L)刺激24h,观察NG2基因表达的变化。设计两条针对NG2mRNA不同靶序列的干扰序列,构建针对NG2基因的shRNA表达载体Pgenesil—siNG21和Pgenesil-siNG22;选择不与任何基因同源的序列NC作为阴性对照。
运用脂质体将3种质粒分别转染RMC,24h后荧光倒置显微镜观察转染效率,即增强绿色荧光蛋白(EGFP)表达率,荧光定量PCR法和Western印迹法观察NG2的干扰效率。以高糖刺激转染的RMC,用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTY)和流式细胞仪(FCM)检测RMC增殖的变化。结果发现与低糖和甘露醇对照组比较,高糖刺激RMC后NG2表达水平明显升高,分别增高(65±32)%和(63±28)%,差异有统计学意义(P〈0.01)。质粒转染RMC24h后,EGFP的表达率为(50±10)%。高糖刺激后,干扰质粒转染组RMC增殖缓慢,与对照组比较差异有统计学意义(P〈0.01)。由此,研究者得出结论,针对NG2基因的shRNA对高糖诱导的RMC增殖有明显的抑制作用。
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