1.受试者的选择：一般选择健康男性；年龄一般在18～40岁，同批受试者年龄一般不宜相差10岁或以上；体重与标准体重相差±10％，同批受试者体重应相近，体重单位以kg计；

　　身体健康，无心、肝、肾、消化道、神经系统疾病以及代谢异常等病史，并进行健康体检（如检查心电图、血压、心率、肝功能、肺功能和血象等），应无异常；无药物过敏史，无体位性低血压史。两周前至实验期间不服用其他任何药物，实验期间禁烟、酒及含咖啡因的饮料。试验单位应与志愿受试者签订知情同意书。

　　2.参比制剂与受试制剂参比制剂：生物利用度和生物等效性研究，必须有参比制剂作对照。参比制剂的安全性和有效性应该合格，参比制剂选择的原则如下：进行绝对生物利用度研究时选用上市的静脉注射剂为参比制剂。进行相对生物利用度或生物等效性研究时，应选择国内外同类上市主导产品作为参比制剂。

　　受试制剂：受试制剂应为符合临床应用质量标准的放大试验产品，提供体外溶出度、稳定性、含量或效价等数据。个别药物尚需提供多晶型及光学异构体资料。

　　3.试验设计：对于两个制剂，即一个为受试制剂，另一个为参比制剂。通常采用双周期两制剂交叉试验设计，以抵消实验周期和个体差异对实验结果的影响。即将受试者随机分成两组，一组先服用受试制剂，后服用参比制剂；另一组先服用参比制剂，后服用受试制剂。两个试验周期之间为洗净期，洗净期通常为1周或2周。

　　对于3个制剂，即两个受试制剂和一个参比制剂，此时宜采用3制剂、3周期的二重3×3拉丁方式试验设计。同样每个周期之间的洗净期通常为1周或2周。

　　取样点对实验结果的可靠性起着十分重要的作用。服药前取空白血样。一个完整的血药浓度-时间曲线应包括吸收相、分布相和消除相。一般在血药浓度-时间曲线峰前部至少取4个点，峰后部取6个或6个以上的点，峰时间附近应有足够的取样点，总采样点不少于11个点。取样持续到3～5个半衰期或血药浓度为Cmax的1／10～1／20.血样（血浆、血清或全血）应立即冷冻备测。

　　4.服药剂量：进行生物利用度与生物等效性研究时，药物剂量一般应与临床用药剂量一致。受试制剂和参比制剂最好应用等剂量。如需使用不相等剂量时，应说明原因，计算生物利用度时应以剂量校正。

　　5.研究过程：受试者禁食过夜（10小时以上），于次日早晨空腹服用受试制剂或参比制剂，用250ml温开水送服。服药后2小时后方可饮水，4小时后进统一标准餐。受试者于服药后，按要求在不同时间取静脉血。根据需要取血样（全血、血浆或血清），并冷冻贮存，备测。受试者服药后避免剧烈活动。取血样在临床监护室中进行。如受试者有不良反应时应有应急措施，必要时应停止试验。

　　6.药物动力学分析：将所得的各受试者不同时间样品的血药浓度数据及平均值与标准差列表并作图，然后分别对各受试者进行有关药物动力学参数求算，并求出参数的平均值和标准差。

　　主要的药物动力学参数为消除半衰期（t1/2）、峰浓度（Cmax）、峰时间（tmax）和血药浓度-时间曲线下面积AUC.Cmax、tmax用实测值表示，不得内推。AUC0→t（零到t时间的血药浓度-时间曲线下面积）用梯形法计算，tn是最后一次可测浓度的取样时间。AUC0→∞（零到无限大时间的血药浓度-时间曲线下面积）按下式计算，AUC0→∞＝AUC0→tn + Ctn/λZ.Ctn是最后一点的血药浓度，λZ是末端消除速度常数。t1/2可按t1/2＝0.693／λZ求出。λZ可用对数血药浓度-时间曲线线末端直线部分的斜率求得。

　　零时间至最终采血点的AUC0→tn要求（AUC0→tn／AUC0→∞）×100％＞80％。

　　7.生物利用度计算（1）单次给药：生物利用度F应用各个受试者的AUC0→tn和AUC0→∞分别计算，并求其均值与标准差。受试制剂（T）和参比制剂（R）剂量相同时：

　　代谢产物数据：对于一些前体药物，由于药物在体内代谢极快，无法测定血中原型药物，此时可采用相应的活性代谢物进行生物利用度研究。

　　结果判断以AUC0→tn为主，参考AUC0→∞。

　　（2）多次给药：在下列情况下，可考虑多次给药达稳态后，用稳态血药浓度估算生物利用度：

　　①药物吸收程度相差不大，但吸收速度有较大差异；

　　②生物利用度个体差异大；

　　③缓释、控释制剂；

　　④当单次给药后原药或代谢产物浓度很低，不能用相应的分析方法精密测得。