色谱法：是一种物理或物理化学分离方法。用于定性鉴别、纯度检查、含量测定。

分配系数：组分在固定相和流动相之间的分配平衡时的浓度之比。

第二节 薄层分析法

一般指吸附薄层色谱法，固定相为吸附剂的薄层吸附法。K值越大随展开剂移动的速度越慢。

比移徝：在薄层色谱法中，组分的迁移距离（ ）与展开剂的迁移距离（ ）之比称为比移值（ ） .

R 最佳范围是0.3-0.5 ，可用范围是0.2-0.8 .

吸附剂：吸附薄层色谱法的固定相。医学教育网 搜集整理常用吸附剂有：硅胶、氧化铝、硅藻土、纤维素和聚酰胺。

硅胶：在105-110 C加热30分，使硅胶吸附力增加，称为活化。具微酸性，适分离酸性中性物质。

氧化铝：碱性、中性、酸性。中性用得多。

制备薄层板：要求吸附剂涂布均匀表面光滑，使用前检查均匀度。2000版用机械涂布法。活化。

吸附剂与展开剂的选择：分离极性较强的组分时，宜选用活性低（活度级别高）的薄层板，以极性强的展开剂展开。反之

点样：体积宜在20ul 以下，样径不超过2-3mm ，点间距离为1.5-2.0cm，距底2.0cm .

显色方法：直接喷雾法、浸渍法、压板法。医学教育网 http://www.med66.com

定性分析方法、纯度检查、定量分析方法（洗脱测定法和直接测定法）。

第三节 气相色谱法

气相色谱法：以气体为流动相的色谱法称为气相色谱法。不适用于难挥发和热稳定性差的物质分析。

原理：各组分在固定相与载气（流动相）间分配系数不等，按大小依次被载气带出色谱柱，小先流出。

一、基本原理：

（一）基本概念：

一个组分的色谱峰用三项参数：峰高或峰面积（用于定量）、峰位（用保留值表示，用于定性）、峰宽（用于衡量柱效）。

（1）、保留时间 （tR） ：从进样开始到某个组分的色谱峰顶点的时间间隔。

（2）、死时间 （t0）：分配系数为零的组分的保留时间。

（3）、相对保留值 （r）：两组分的调整保留值之比。

（4）、半峰宽 （Wh/2）：峰高一半处的峰宽。医学教育网 http://www.med66.com

（二）塔板理论：

塔板理论方程式（高斯方程式）：

理论塔板式数： 理论塔板高度：

（三）速率理论： H=A+B/u+Cu

影响塔板高度的因素：医学教育网搜集整理1、涡流扩散 2、纵向扩散 3、传质阻抗

二、气相色谱仪：

（1）、色谱柱：固定相与柱管组成。 填充柱、毛细管柱； 分配柱、吸附柱

（2）、固定液：高沸点的液体，操作下为液态。 甲基硅油、聚乙二醇等

选择原则：按相似性、按主要差别、按麦氏差别选择。

（3）、载体：化学惰性的多孔性微粒

（4）、毛细管色谱柱：开管型、填充型

（5）、检测器：

1、浓度型检测器：热导检测器和电子捕获检测器

2、质量型检测器：氢焰离子化检测器医学教育网 http://www.med66.com

中国药典2000对气相色谱规定：除检测器种类、固定液品种及特殊指定的色谱柱材料不得任意更改外，其他均可适当改变，色谱图于30min内记录完毕。

第4节 高效液相色谱法

一、 基本原理：影响柱效的主要因素是涡流扩散和传质阻抗。

分类：1、液固吸附色谱法：流动相为液体，固定相是固体吸附剂。

二、液—液分配色谱法：固定相几乎全是化学键合硅胶，又称化学键合相色谱法。

按固定相和流动相的极性2又分：正相色谱法和反相色谱法

正相色谱法：流动相极性小于固定相极性的色谱法。用于分离溶于有机溶剂的极性及中等极性的分子型物质，用于含有不同官能团物质的分离。 极性弱组分先流出

反相色谱法：

三、 高效液相色谱仪：

1、高压输液泵

2、色谱柱

3、进样阀

4、检测器：紫外吸收检测器、荧光检测器、差示折光检测器、电化学检测

中国药典2000对高效液相色谱法规定：除固定相种类、医学教育、网搜集整理流动相组分、检测器类型不得任意更改外，其余均可适当改变，色谱图于20min内记录完毕。

第5节 色谱系统适用性试验和定量分析方法

一、系统适用性试验

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