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多肽链氨基酸序列分析方法及关键试剂名称是临床助理医师考试需要了解的内容，医学教育网搜集整理了相关知识点，以便广大考生参考学习。
氨基酸序列分析
1.步骤一：分析已纯化蛋白质的氨基酸组成
2.步骤二：测定多肽链的氨基末端与羧基末端为何种氨基酸。以前用二硝基氟苯，现多用丹酰氯
3.步骤三：将肽链水解成片段（表1-2）。
表1-2 三种肽链水解方式的比较
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胰蛋白酶
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胰凝乳蛋白质酶
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溴化氢法
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作用部位
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赖氨酸或精氨酸羧基侧的肽键 |
芳香族氨基羧基侧的肽键 |
甲硫氨酸羧基侧的肽键 |
4.步骤四：测定各肽段的氨基酸排列顺序，采用Edman降解法，试剂为异硫氰酸苯酯
5.步骤五：统计学分析，组合排列对比，得到完整肽链氨基酸排列顺序
通过核酸来推演蛋白质中的氨基酸序列的步骤：
1.步骤一：分离编码蛋白质的基因
2.步骤二：测定DNA序列
3.步骤三：排列出mRNA序列
4.步骤四：按照三联密码的原则推演出氨基酸的序列
蛋白质空间结构测定
蛋白质二级结构含量测定：圆二色光谱法，测α-螺旋较多的蛋白质时，结果较为准确。
蛋白质三维空间结构测定：X射线衍射法和磁共振技术。 |
